利来国际提供的淋巴母细胞HMy2CIR的培养说明书如下：

一、细胞培养条件

细胞在接收后请务必遵循适宜的处理方法，培养至良好状态后，灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最佳方式。收到细胞后，先用75%酒精喷洒整个细胞瓶进行消毒，随后在超净工作台内进行无菌操作。将细胞瓶静置于37℃、5% CO2的培养箱中3-4小时，以确保细胞状态稳定后再进行后续操作。

二、细胞处理步骤

a、细胞传代

在细胞密度未超过80%时，将培养液收集至离心管中，保留5ml完全培养基，然后置于37℃、5% CO2的孵箱中培养；当细胞密度超过80%时，可以开始传代，具体步骤如下：

1. 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS清洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟；在显微镜下观察细胞状态，若细胞大部分变圆并脱落，迅速轻击培养瓶，加入5ml以上完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1：2的比例分瓶传代至两个T25瓶中，补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。

b、细胞冻存

1. 当细胞生长至覆盖培养瓶80%时，弃去培养液，用PBS清洗细胞一次；
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，观察细胞在倒置显微镜中的状态，待细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养液以终止消化，轻轻吹打使其脱落，将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟；
3. 弃去上清，沉淀细胞时加入1ml的雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后置入冻存管中；
4. 将冻存的细胞直接放入-80℃冰箱，若后期需将细胞转入液氮罐，需在-80℃冰箱存放24小时以上后再进行转移。

c、细胞复苏

1. 从液氮中取出细胞冻存管（请佩戴防护面具），快速置于37℃水浴中解冻，直至无结晶后，用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2. 将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟；
3. 弃去上清，沉淀再用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，并置于37℃、5% CO2的培养箱中；
4. 第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

在细胞运输过程中，一些细胞可能因贴壁不牢而发生脱落，这属于正常现象。如果脱落较多，可以将培养瓶内的培养液收集至离心管进行沉淀和进一步处理。务必在操作过程中保持无菌，以确保细胞的活性与生长状态。

五、售后条款

1）细胞问题的重发条件：

1. 如细胞在运输过程中出现丢失、瓶身破损、培养液漏液等情况，可申请重发；
2. 如细胞在48小时内出现污染需提供真实实验结果，核实后可重发；
3. 对于常温发货的细胞静置24小时后，或干冰发货的细胞复苏后24小时内如未存活（需提供清晰的细胞状态照片），可申请重发；
4. 若细胞在复苏后或未开封情况下出现污染，可以申请重发；
5. 如细胞活性有问题，需在收货7天内提供真实实验结果并进行鉴定，核实后予以重发；
6. 在收到细胞的当天以及第2、3天需拍照以确保细胞状态良好。

2）细胞问题不予重发的情况：

1. 客户自行造成的细胞污染不予重发；
2. 不当操作导致的细胞状态不佳不予重发；
3. 非推荐的细胞培养体系导致的不良状态不予重发；
4. 若未能提供细胞培养前3天的照片，则不予重发；
5. 在培养过程中进行了其他处理的细胞不予重发；
6. 若在收到2天内未及时告知的问题，则不予重发；

如有疑问，请及时联系利来国际客服，我们会为您提供专业的技术支持。