实验原理：将血清脂蛋白通过脂类染料（例如苏丹黑或油红O）进行预染，然后将预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在加电后，脂蛋白向正极移动，并会被分为多个区带。

试剂与器材：

• 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：准备电极缓冲液，包含巴比/妥钠 154g、巴比/妥276g、EDTA酸 0.292g，溶解后加水至 1000ml。
• 三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液（pH 8.6）：作为凝胶缓冲液，包含三羟甲基/氨基甲/烷 12.12g、EDTA酸 0.29g、NaCl 15.85g，溶解后加水至 1000ml。
• 琼脂糖凝胶：琼脂糖 0.45g、三羟甲基/氨基甲/烷缓冲液 50ml、水 50ml，加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后立即停止加热。
• 挖槽工具：制作切口刀和挖槽小匙，以便于在凝胶中挖出样品。切口刀具长 15mm，中央夹有机玻璃或木片，挖槽小匙用直径 15mm 的铜丝制成一端锤成扁平状。
• 电泳槽和电泳仪：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所需仪器相同。

操作步骤：

1. 预染血清：将 0.2ml 血清与 0.2ml 苏丹黑染色液混合，置于 37℃ 水浴中染色 30 分钟，然后以 2000 转/分离心约 5 分钟。
2. 制备琼脂糖凝胶板：将 0.45% 琼脂糖凝胶加热融化后，用吸管将其浇注到载玻片上，每片约 25ml，静置约 30 分钟直至凝固。
3. 点加血清：在凝固的琼脂糖凝胶板上约 2cm 处用切口刀切入，然后用铜丝小匙取出长方形小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽中的水分后，用血色素吸管吸取约 15μl 的预染血清注入小槽。
4. 电泳：将添加血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品在阴极端。将纱布浸入巴比/妥缓冲液中，轻轻贴在凝胶板两端，注意另一端浸在电泳槽的缓冲液中。接通电源，电压设定为 120~130V，每片电流 3~4mA。经过约 15 至 55 分钟后即可观察到分离的色带。

注意事项：

• 电泳样品必须是新鲜的空腹血清。
• 每块凝胶可平行挖两条小槽，以添加两个样品。
• 可使用与小槽形状相同的有机玻璃片在琼脂糖凝固前固定，待其凝固后取出，形成小槽以直接加样。
• 若需要保留电泳样本，可将电泳后的凝胶板（连同玻片）放入清水中浸泡脱盐 2 小时，再放入烘箱（80℃）烘干。

结果及临床意义：

1. 正常血清脂蛋白可见三条区带，依次为β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（稍深），原点处无乳糜微粒。
2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深，结合血清甘油三酯明显升高且胆固醇正常或略高，可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。
3. β-脂蛋白区带明显深染且伴随血清总胆固醇增高、甘油三酯正常者属Ⅱa型；若血清总胆固醇增高、甘油三酯略高且前β略溶者为Ⅱb型。
4. 若β-和前β-区带连成宽带，且结合血清甘油三酯和胆固醇均升高，则诊断为Ⅲ型。
5. 若原点出现乳糜微粒，且β及前β均正常或降低，结合血清甘油三酯明显升高则可诊断为Ⅰ型。

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