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解决琼脂糖凝胶电泳问题,利来国际助您轻松应对

发布时间:2025-03-18   信息来源:穆亮固

琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂或琼脂糖为支撑介质的电泳技术。这种方法适用于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,通常采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行有效分离。在进行琼脂糖凝胶电泳实验时,常见的问题包括:

解决琼脂糖凝胶电泳问题,利来国际助您轻松应对

电泳带模糊及DNA降解

为避免核酸酶对样品的污染,必须确保试剂和缓冲液的新鲜度。电泳缓冲液如果长时间未更换,可能导致离子强度下降、pH值升高,这样将影响电泳效果。因此,建议定期更换电泳缓冲液。

适宜的电泳条件

在电泳过程中,电压应保持在20V/cm以下,温度控制在30℃以下。对于超大DNA链的电泳,温度应低于15℃。务必检查电泳缓冲液的缓冲能力是否充足,以确保电泳的有效性。

优化DNA上样量

如果DNA样本的上样量过多,可能导致带形不清晰,建议适当减少样本量。同时,过高的盐分含量也会影响结果,应在电泳前通过乙醇沉淀去除多余的盐分。

蛋白污染和DNA变性

为避免蛋白质的污染,可以通过酚抽提方法去除蛋白质。在电泳前,还应使用20mM NaCI缓冲液稀释DNA,切忌加热DNA样本。

解决无DNA带及弱DNA带的问题

如果电泳结果显示DNA带缺失或过于微弱,需检查上样量,适当增加DNA样本的使用量。由于聚丙烯酰胺凝胶电泳的灵敏度优于琼脂糖凝胶,您可以适度降低上样量。

针对分子大小相近的DNA

DNA带难以分辨时,应延长电泳时间并确认适宜的凝胶浓度。避免在电泳前高温加热DNA链,以20mM NaCI缓冲液进行稀释。

使用利来国际的琼脂糖凝胶电泳产品

为了确保琼脂糖凝胶电泳实验的顺利进行,注意以下几点:

  1. 在配制试剂时,务必确保引物、酶和超纯水的有效性以及未受污染,最好将这些试剂标明个人名称并妥善保管,避免他人翻动时造成干扰。
  2. 选用成熟的PCR体系进行操作,以提高实验的成功率。
  3. 在PCR开始时即准备好凝胶,让其冷却,以保证孔径的均匀性。如果需隔天再进行电泳,请将PCR样本存放在4℃。
  4. 建议使用排枪进行样品上样,以提高效率和一致性,选择高质量的进口枪头更能保障实验的可靠性。
  5. 不论电泳室的使用频率如何,建议每次电泳时更换缓冲液,以避免影响电泳结果的因素。

结合利来国际的高品质电泳产品与细致的实验步骤,将有助于取得理想的电泳结果。