His标签蛋白纯化的挑战

His标签专为重组蛋白的纯化而设计，通常由6到10个组氨酸残基组成。由于其相对较小的分子量，对目标蛋白性质的影响较小，因此成为当前最常用的标签。在His标签蛋白纯化过程中，标签蛋白与金属离子之间的结合强度至关重要。这一过程受多种因素的影响，包括镍离子的配位情况、标签的长度、位置（C端或N端）、标签的暴露程度以及缓冲液的pH值等。实际的纯化过程中，常常会遇到标签蛋白挂柱较弱的问题，导致大量目标蛋白流失，最终影响目标蛋白的纯度与收率，严重时甚至会导致目标蛋白完全不结合。

新型镍亲和纯化介质——VDXNTANiultra

利来国际推出的VDXNTANiultra特别适合用于那些在传统镍亲和介质中表现不佳或流失量较大的His标签蛋白的纯化。

应用案例

材料与方法：在相同条件下，使用传统的Ni-NTA与VDXNTANiultra对同一标签蛋白进行纯化。

实验结果：在相同的上样条件下，传统的Ni-NTA在结合和清洗过程中的目标蛋白损失显著，导致目标蛋白的回收率降低。而VDXNTANiultra表现出更强的结合力，明显减少了蛋白损失，回收率远高于传统Ni-NTA。

层析条件

层析柱：VDXNTANiultra、传统Ni-NTA；5mL柱，柱高10cm；

样品：大肠杆菌裂解液；

平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0；

洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0；

流速：1mL/min。

在生物医疗研究中，蛋白质的纯化是至关重要的，选择合适的纯化介质能大大提高实验的效率，利来国际的VDXNTANiultra正是这一需求的优秀解决方案。