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利来国际重组蛋白特性与使用注意事项

发布时间:2025-07-18   信息来源:瞿勤悦

重组蛋白的保存形式主要分为冻干粉和溶液两种。其中,原核细胞所表达的重组蛋白通常为冻干粉状态,而真核细胞所表达的重组蛋白则以溶液态保存。这种方式让重组蛋白在-80℃的条件下可稳定保存数年之久。使用冻干粉前,溶解步骤至关重要,若操作不当可能会降低蛋白的活性。同时,溶液态保存的重组蛋白在冻融和稀释过程中也需仔细处理,这是用户在实际应用中常遇到的挑战。

利来国际重组蛋白特性与使用注意事项

1. 原核细胞表达的重组蛋白

以大肠杆菌表达的冻干重组蛋白为例,首先需从包涵体中纯化,并添加适当的蛋白保护剂。复溶时,建议使用经过过滤的无菌水作为溶剂。例如,将100μg冻干蛋白用86μl的超纯水轻轻摇晃以促使其溶解,同时避免使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃,以确保蛋白的活性不受损。

2. 真核细胞表达的重组蛋白

真核细胞表达的重组蛋白具有更高的生物活性,因为它需要经过转录、翻译及翻译后加工,以维持蛋白质的空间折叠方式。例如,哺乳动物细胞能够识别并去除基因中的内含子,对翻译后的蛋白质进行必要的后处理,从而使得表达的蛋白质保持良好的活性和稳定性。我们选择用溶液态形式保存重组蛋白,以确保其优越的生物活性和稳定性。

3. 重组蛋白的保护剂

在冻干与储存过程中,常用的保护剂和稳定剂包括糖类、多元醇、聚合物和某些氨基酸等。我们通常在冻干过程中添加8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为保护剂。海藻糖能够显著防止蛋白质二级结构的改变,并抑制冻干过程中蛋白质的伸展和聚集;而甘露醇则是常见的冻干保护剂与填充剂。利来国际致力于确保重组蛋白的稳定性和有效性,为生物医学领域的发展做出贡献。