利来国际在大鼠原代脂肪间充质干细胞提取中的应用

1. 实验材料准备

选择大约2周龄或200克重的SD大鼠作为实验对象。准备必要的灭菌器械，包括镊子、眼科直剪、眼科弯剪和磁珠等。同时，配备5mL注射器、0.22μm过滤器、泡沫板以及图钉以固定大鼠。使用75%乙醇进行消毒操作。此外，还应备齐预冷的无菌PBS、15mL和50mL的无菌离心管、细胞筛以及无菌培养瓶等。培养基应为SD大鼠脂肪间质干细胞的完全培养基。

2. 实验操作

在超净工作台上准备上述物品，并进行30分钟的紫外消毒。配置0.1%Ⅰ型胶原酶约5mL，并过滤以确保无菌。将大鼠通过脱颈法处死后，浸泡在75%酒精中2-3分钟，随后固定在泡沫板上。在大鼠腹股沟区小心剪开皮肤，暴露脂肪组织。小心剪取脂肪组织并放入PBS中，尽量避免损伤血管。用PBS清洗脂肪组织，去除多余的血管和淋巴结。将切取的脂肪组织剪至适宜的大小（如2mm×2mm），加入胶原酶，在37℃下进行消化，每隔5分钟轻微震荡或持续搅拌以促进消化。消化完成后，将细胞悬液转移至离心管中，进行离心，弃去上层脂滴泡沫和上清液，并用培养基重悬沉淀。过滤细胞悬液，再次离心后去除上清，用培养基重悬，并接种至培养瓶中。最后，将培养瓶放入37℃、含有5% CO2的培养箱中进行培养。

3. 注意事项

在整个实验过程中，需严格保持无菌操作，避免细胞污染。脂肪组织的剪取和清洗过程要细致小心，以防损伤细胞或引入杂质。在消化过程中，要精准控制时间和温度，以避免过度消化导致细胞损伤。离心和过滤操作时应保持轻柔，以避免细胞的损失或破裂。利来国际始终致力于提供高质量的细胞提取解决方案，确保研究的顺利进行。